期刊简介
中华人民共和国卫生部主管，中华医学会、四川大学华西第二医院、中国医学科学院输血研究所主办。本刊是高级别输血及血液学基础及临床相结合的学术刊物，主要报道输血及血液学领域的基础和临床科研成果、进展，临床诊断、治疗的新经验、新方法和新技术，介绍国内外研究动态，开展学术交流，促进输血及血液学领域的基础及临床研究发展。被清华大学“中国知识资源总库”、“中国核心期刊（遴选）数据库”、“重庆维普数据库”等收录。
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首页>国际输血及血液学杂志
- 杂志名称：国际输血及血液学杂志
- 主管单位：中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会
- 主办单位：中华医学会 四川大学华西第二医院 中国医学科学院输血研究所
- 国际刊号：1673-419X
- 国内刊号：51-1693/R
- 出版周期：双月刊
期刊荣誉：四川省期刊加工奖期刊收录：国家图书馆馆藏, 上海图书馆馆藏, 知网收录(中), 万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), CA 化学文摘(美), 维普收录(中)
PCR扩增产物磁珠纯化法应用于HLA测序分型的研究
王大明；何柳媚；徐筠娉；高素青；邓志辉
关键词：HLA, 测序分型, PCR产物纯化
摘要：目的 探讨PCR扩增产物磁珠纯化法应用于HLA测序分型的可能性.方法 采用本实验室建立的HLA-C基因测序分型方法 中的PCR扩增、测序反应和测序纯化等步骤,对96份标本特异性扩增HLA-C基因外显子1～4目的 序列片段约为2 000 bp,扩增产物分别采用OMEGA公司(瑞士)磁珠纯化法及USB公司(美国)的外切酶I和虾碱性磷酸酶的混合物和Atria HLA-C SBT plus试剂盒配套使用的外切酶I和虾碱性磷酸酶的混合物进行纯化和平行对照,经HLA-C基因第2、3和4外显子双向测序反应,纯化后的测序反应产物采用ABI 3730测序仪电泳检测,Assign 3.5.1.45分析软件判定结果,统计可判定受检者HLA基因型的样本的总数,并计算BCS(base calling score)平均值.结果 经磁珠纯化法纯化PCR扩增产物测序反应后得到的序列质量BCS平均值为81.191±3.539;Atria ExoSAP-IT纯化后测序反应所获得序列BCS平均值为79.946±3.778,USB外切酶I和虾碱性磷酸酶的混合物测序反应所获得序列BCS平均值为70.384±5.778.上述纯化方法 的碱基A,G,C和T的峰高均在1 000以上;平均每人份10μL扩增产物的纯化成本,磁珠法明显比外切酶I和虾碱性磷酸酶的混合物法便宜很多.结论 磁珠纯化试剂成本低、无需冷冻保存,HLA测序分型中序列质量效果较好,具有良好的实用价值.
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